Съдържание

• По-добро гледане
• Идентификация и класификация
• Откриване на осъществимост
• Идентифициране на клетъчни структури

Микробиолозите изследват характеристиките на микроорганизмите, като водорасли, бактерии, протозои, гъби и вируси, с помощта на микроскоп. Въпреки че някои организми, като протозои и клетки от дрожди, се виждат лесно чрез слайдове, бактериалните клетки изискват оцветяване. Учените са разработили няколко метода, като техниката на Грам оцветяване, киселинно устойчиво оцветяване и флуоресцентно оцветяване, за да подобрят визуализацията на бактериалните клетки и клетъчните структури. Използвайки такива методи за оцветяване, е възможно да се идентифицират структурните характеристики, които помагат за класифицирането на бактериите.

По-добро гледане

Бактериалните организми са толкова малки, че повечето от тях се виждат само под микроскоп със сила на увеличение 1000 пъти. Простото увеличаване на размера обаче не осигурява достатъчна степен на яснота, така че бактериите трябва да бъдат оцветени преди наблюдението, за да се осигури яснота, необходима за визуализация.

Идентификация и класификация

Оцветяването на бактериите, за да се прави разлика между видове бактерии, е известно като диференциално оцветяване. Грам оцветяването е диференциално оцветяване, което отличава бактериите в зависимост от съдържанието на клетъчната стена. При този метод бактериалните клетки реагират с кристално виолетово багрило, за да станат виолетови. Чрез добавянето на избелващо средство някои бактериални клетки губят цвета си, докато други не. Чрез добавянето на сафраниново багрило, обезцветените клетки стават червени, докато бактериалните клетки, които не губят цвят, остават виолетови. Клетките, които стават червени, се наричат ​​грам-отрицателни организми, а клетките, които не стават червени, се класифицират като грам-положителни организми. Техниката на оцветяване по Грам осигурява бърз метод за първоначално идентифициране на бактерии, участващи в инфекции. По същия начин, киселинно-устойчивият процес на оцветяване помага конкретно да се идентифицират организмите, принадлежащи към класа бактерии, наречени микобактерии, като Mycobacterium tuberculosis.

Откриване на осъществимост

В пробите от бактериални култури често е важно да се установи наличието на живи бактериални клетки. Методи като флуоресцентно оцветяване помагат да се установи дали култивиращите клетки са жизнеспособни или не. Живите бактерии имат способността да превръщат тетразолиев 5-циано-2,3-дитолил хлорид (CTC) в багрило, което показва червена флуоресценция. Следователно, когато културите с ЦТК излъчват тези флуоресценции, това показва наличието на жизнеспособни бактерии. Пропидиум йодидът е петно, което действа само върху неживи клетки, които са повредени мембрани и следователно е полезно при идентифициране на мъртвите бактериални клетки.

Идентифициране на клетъчни структури

Оцветяването осигурява метод за ясна визуализация на различни клетъчни структури. Например, методът на оцветяване на Feulgen позволява идентифициране на ядрото в бактериалните клетки, докато оцветяването с Albert е полезно при визуализиране на метахроматични гранули. По същия начин техниката за импрегниране със сребро позволява идентифициране на спирохети. Флагелите са лесни за наблюдение, когато са оцветени с оцветяването на Рю. Малахитовото зелено оцветяване помага за идентифициране на бактериални спори.