Съдържание

• По-добра визуализация
• Идентификация и класификация
• Откриване на осъществимостта
• Идентифициране на клетъчни структури

Микробиолозите изследват характеристиките на микроорганизмите, като водорасли, бактерии, протозои, гъбички и вируси, с помощта на микроскоп. Въпреки че някои организми, като протозои и дрождеви клетки, се виждат лесно чрез предметни стъкла, бактериалните клетки изискват оцветяване. Учените са разработили редица методи, като Gram оцветяване техника, киселинно-бързо оцветяване и флуоресцентно оцветяване за подобряване на визуализацията на бактериални клетки и клетъчни структури. Използвайки такива методи за оцветяване, е възможно да се идентифицират структурните характеристики, които спомагат за класифицирането на бактериите.

Техниката на оцветяване помага за подобряване на визуализацията на бактериите (Дънкан Смит / Stockbyte / Getty Images)

По-добра визуализация

Бактериалните организми са толкова малки, че повечето от тях се виждат само под микроскоп с увеличение от 1000 пъти. Обаче простото уголемяване не осигурява достатъчна степен на яснота, затова бактериите трябва да бъдат оцветени преди наблюдение, за да се осигури яснотата, необходима за визуализация.

Идентификация и класификация

Оцветяването на бактериите за разграничаване на видовете бактерии е известно като диференциално оцветяване. Оцветяването по грам е диференциално оцветяване, което отличава бактериите като функция от съдържанието на клетъчната стена. При този метод бактериалните клетки реагират с кристална виолетова боя, за да се превърне във виолетов цвят. Чрез добавяне на оцветяващ агент някои бактериални клетки губят цвят, докато други не. Чрез добавяне на сафраниново багрило, обезцветените клетки придобиват червено оцветяване, докато бактериалните клетки, които не губят цвета си, остават виолетови. Червените клетки се наричат ​​грам-отрицателни организми, а тези, които не стават червени, се класифицират като грам-положителни организми. Техниката на оцветяване по Грам осигурява бърз метод за първоначално идентифициране на бактерии, участващи в инфекции. По същия начин киселинно-устойчивият процес на оцветяване спомага за специфично идентифициране на организми, принадлежащи към класа на бактериите, наречени микобактерии, като Mycobacterium tuberculosis.

Откриване на осъществимостта

В проби от бактериална култура често е важно да се открие наличието на живи бактериални клетки. Методи като флуоресцентно оцветяване помагат да се определи дали културалните клетки са жизнеспособни или не. Живи бактерии имат способността да превръщат тетразолиев хлорид 5-циано-2,3-дитолил (CTC) в багрило, което показва червена флуоресценция. Следователно, когато CTC-оцветените култури отделят тези флуоресценции, това показва наличието на жизнеспособни бактерии. Пропидиев йодид е оцветяване, което действа само върху неживи клетки, които имат увредени мембрани и следователно е полезно за идентифициране на мъртви бактериални клетки.

Идентифициране на клетъчни структури

Оцветяването осигурява ясен метод за визуализация на различни клетъчни структури. Например, методът на Feulgen оцветяване позволява идентифицирането на ядрото вътре в бактериалните клетки, докато оцветяването на Albert е полезно при визуализацията на метахроматични гранули. По същия начин, техниката на импрегниране със сребро позволява идентифицирането на спирохетите. Костенурките се виждат лесно, когато са оцветени с оцветяването на Ryu. Малахитното оцветяване помага за идентифициране на бактериални спори.